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        上海锐谷:ELSIA试剂盒、生化试剂、对照品、染色液、实验耗材
        培养基
        血清
        ELISA检测试剂盒
        科研试剂
        实验用耗材
        对照品
        染色液试剂盒
        培养基系列
        病理科用品
        进口试剂
        名称:上海锐谷生物科技有限公司
        电话:86-021-61845780
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        大鼠抵抗素(resistin)Elisa试剂盒.

        点击次数:1365 发布时间:2011/2/15
        提 供 商: 上海锐谷生物科技有限公司 资料大小:
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        详细介绍:

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒试剂盒名称】

        大鼠抵抗素(resistin)定量检测试剂盒(ELISA

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒试剂盒用途

        定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中抵抗素(resistin的含量。

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒检测原理

        本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠抵抗素(resistin单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物AB,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠抵抗素(resistin)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠抵抗素(resistin含量。

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒试剂盒组成

         

        1

        酶标包被板

        12×8

        7

        显色剂A

        6mL

        2

        标准品

        0.3mL×6

        8

        显色剂B

        6mL

        3

        20倍浓缩洗涤液

        25mL

        9

        终止液

        6mL

        4

        样本稀释液

        6mL

        10

        说明书

        1

        5

        特殊稀释液

        6mL

        11

        封板膜

        2

        6

        酶标试剂

        6mL

        12

        密封袋

        1

         

        备注:标准品(16号)浓度依次为:8040201052.5 μg/L

         

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材

        137恒温箱

        2、标准规格酶标仪

        3、精密移液器及一次性吸头

        4、蒸馏水

        5、一次性试管

        6、吸水纸

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒操作步骤】

        1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。

        2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

        3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。

        4、温育:37水浴锅或恒温箱温育30min

        5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

        6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。

        7、温育:37水浴锅或恒温箱温育30min

        8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

        9、显色:每孔先加入显色剂A 50μL,再加入显色剂B 50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37避光显色15min

        10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

        11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。

        12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒样本要求】

        1、样本不能含叠氮钠(NaN3,因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

        2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

        3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。

        【大鼠抵抗素(resistinElisa试剂盒注意事项】

        1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。

        2酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。

        3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

        4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。

        5、本试剂盒定量范围为2.5-80μg/L,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(2.5-80μg/L范围内),乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。

        6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

        7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜

        8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。

        9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

         
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